建筑安全生产知识普及读本分子生物学技术简介
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发布时间：2024-10-24 11:21
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时间：2024-10-26 18:15
随着生命科学和化学的深入发展，人们对生物体的认识已经深入到分子水平，通过检测核酸序列的线性结构来分析物种差异。这为生物学和医学研究提供了强大的技术平台。以下是几种常用的分子生物学技术介绍：
1. PCR-SSCP (单链构象多态性分析)：广泛用于基因突变检测，基于DNA构象变化区分野生型和突变型。尽管敏感度高，但无法定位突变位置，且对较长外显子突变检测效果下降。结合异源DNA双链分析（SSCP/HA）可以更全面检测突变，但仍无定位信息。
2. 改进技术如RNA rSSCP、ddF和PCR-REF：利用RNA构象敏感性提升突变鉴别，或通过双脱氧测序判断突变。PCR-REF结合*酶指纹技术，提供片段长度和构象的双重突变信息。
3. 变性梯度凝胶电泳(DGGE)：利用DN*段解链温度差异区分突变，对单碱基突变敏感，但不能定位。通过改良PCR引物设计，DGGE检出率接近100%。
4. 双链构象多态分析(DSCA)：利用荧光标记技术，通过杂交双链的迁移率差异判断突变，适用于长片段检测，具有较高的灵敏度和上样量控制。
5. 变性-高压液相色谱(DHPLC)：利用DNA构型变化检测突变，具有高分辨率和自动化优势，适用于大规模基因突变筛查。
6. 特异性等位基因扩增(ASA)：基于PCR的单核苷酸突变检测，引物设计包含错配碱基以区分突变型和野生型。
7. 化学裂解错配碱基法(CCM)：通过化学修饰切割错配碱基，高效定位大片段DNA的突变，但涉及有害化学物质使用。
