MM_FS_CNG_0315 食品中除虫脲残留量的测定
MM_FS_CNG_0315食品 除虫脲 残留量 高效液相色谱法
MM_FS_CNG_0315
食品中除虫脲残留量的测定
1.适用范围
本方法适用于粮食、蔬菜中除虫脲残留量的测定，也适用于水果中除虫脲残留量的测定。最低检出限为0.40ng，若取样2.5g，则最低检出浓度为0.04mg／kg。
2.原理概要
样品中的除虫脲经浸提、净化后，用具有紫外检测器的高效液相色谱仪测定，与标准溶液比较定量。
3.主要试剂和仪器
3.1.主要试剂
主要试剂
二氯甲烷：重蒸；
石油醚：沸程30～60℃，重蒸；
甲醇：重蒸；
浸提液：二氯甲烷-石油醚（3＋4）；
液相色谱流动相：甲醇-水（75＋25）；
硅镁吸附剂型预处理小柱（市售）；
除虫脲标准溶液：准确称取0.0100g除虫脲原药用二氯甲烷溶解并转入100mL容量瓶，用二氯甲烷定容，得到100μg／mL的标准贮备液，经100倍稀释得到1μg／mL的标准使用液。
3.2.仪器
高效液相色谱仪（配有紫外检测器）；
25mL比色管；
K.D浓缩器的梨形瓶；
高速分散器；
电动离心机；
具磨口塞离心管；
10μL微量注射器。
4.过程简述
4.1.样品的粉碎
粮食类样品经粉碎机粉碎后，过40目筛，蔬菜和水果类样品，经组织捣碎机破碎成浆状。
4.2.样品的浸提
称取2.5g粉碎混匀的样品于50mL具塞离心管中，加10mL浸提液，在高速分散器上，以10000r／min速度，分散5min，加塞浸泡30min，再分散5min，以2000r／min，离心5min，转移上清液于25mL比色管中；加5mL浸提液于沉淀中，分散、离心后，上清液并入25mL比色管；再重复一次，上清液也并入25mL比色管，用浸提液定容至25mL，得到样品浸出液。
4.3.样品浸出液的净化
10mL石油醚自然流经预处理小柱，再用5mL二氯甲烷淋洗小柱，见图1，以上流出液弃去，然后取10mL样品浸出液，使其自然流经小柱，流出液收集在K.D浓缩器的梨形瓶中；再用15mL二氯甲烷淋洗小柱，流出液并入上述梨形瓶中。于通风橱中，40℃水浴下，氮气流吹尽梨形瓶中的溶剂，加盖，置于阴凉处保存。
4.4.高效液相色谱参考条件
不锈钢柱：200mm×4.6mm（内径）；固定相：C18（5μm）；流动相：甲醇-水（75∶25）；流速：1mL／min。
4.5.测量
取除虫脲标准使用液0，1，3，5，7，10μL注入色谱测定，利用被测成分浓度对峰高制备标准曲线。
加1mL二氯甲烷于K.D浓缩器的梨形瓶中使样品残渣溶解，取10 μL立即注入色谱仪测定。计算峰面积或峰高，利用标准曲线计算进样前样品残渣溶解液中除虫脲的浓度。
5.结果计算
5.1.计算
见式（1）。
| c×V3× | V1 |
| ……（1） | ||
X＝ | V2 | |||||
m | ||||||
式中：X——食品中除虫脲的含量，mg／kg； c——利用标准曲线算得的样品残渣溶液中除虫脲的浓度，μg／mL； V1——样品浸出液的定容体积，mL； V2——上柱的样品浸出液的体积，mL； V3——溶解样品残渣所用的溶剂体积，mL； m——样品质量，g。 | ||||||
5.2.方法检出限为0.4ng；标准曲线性范围位为1～10ng；平均回收率为95.2％；取样量2.5g时最低检出浓度为0.04mg／kg；相对相差≤15％。
见图2。
1—注射器；2—预处理小柱
图 2.除虫脲的标准色谱图
7.来源：
GB／T 17333—1998
附.录.A
（提示的附录）
方法的回收率、精密度和线性
A1.回收率
表 A1
样品 | 样本数 | 加入量ng／2.5g | 回收量ng／2.5g | 回收率％ | 平均回收率％ | ||||||||
高 | 中 | 低 | 高 | 中 | 低 | 高 | 中 | 低 | 高 | 中 | 低 | ||
小麦 | 6 | 6 | 6 | 15.0 | 7.5 | 2.5 | 13.9 | 7.3 | 2.3 | 92.4 | 96.6 | 92.1 | 93.7 |
谷子 | 6 | 6 | 6 | 15.0 | 7.5 | 2.5 | 13.3 | 7.8 | 2.4 | 88.3 | 103.4 | 95.7 | 95.8 |
柑桔 | 6 | 6 | 6 | 15.0 | 7.5 | 2.5 | 12.8 | 7.1 | 2.2 | 89.1 | 94.8 | 89.5 | 89.8 |
苹果 | 6 | 6 | 6 | 15.0 | 7.5 | 2.5 | 13.8 | 7.8 | 2.2 | 92.2 | 103.4 | 89.5 | 95.0 |
油菜 | 6 | 6 | 6 | 15.0 | 7.5 | 2.5 | 15.9 | 7.1 | 2.5 | 106.4 | 94.8 | 100.0 | 100.4 |
甘蓝 | 6 | 6 | 6 | 15.0 | 7.5 | 2.5 | 14.4 | 7.8 | 2.2 | 95.7 | 103.4 | 89.7 | 96.3 |
X，％ | 92.6 | ||||||||||||
A2.方法精密度
表 A2
实验号 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | X | s | CV，％ |
测定值，mg | 7.25 | 7.76 | 7.11 | 7.76 | 7.11 | 7.76 | 7.46 | 0.33 | 4.5 |
A3.方法的线性（除虫脲含量与峰面积及峰高的关系）
表 A3
含量，ng | 0 | 1 | 2 | 4 | 7 | 10 | R值 |
峰积分值 | 0 | 2950 | 5209 | 9759 | 19034 | 25772 | 0.9998 |
峰 高 | 0 | 9.5 | 18.1 | 37.1 | 62.0 | 91.9 | 0.9996 |